是臨床上常用的免疫抑制劑，在體內(nèi)代謝為活性成分霉酚酸，廣泛用于實(shí)體器官移植和嚴(yán)重的免疫性疾病。由于霉酚酸藥動(dòng)學(xué)個(gè)體差異大，且具有非線性代謝特點(diǎn)，故需進(jìn)行治療藥物監(jiān)測，以反映患者體內(nèi)的藥物暴露量，提高藥物療效并減少毒副作用的發(fā)生'。目前，霉酚酸的檢測方法以色譜法和免疫法為主，其中液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC-MS/MS）法屬于前者，其結(jié)合了高效液相色譜法的高分離性和質(zhì)譜的高敏感性、高特異性，并可以同時(shí)監(jiān)測藥物及其主要代謝產(chǎn)物，是檢測霉酚酸血藥濃度的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但購買及后期維護(hù)費(fèi)用昂貴。酶放大免疫（EMIT）法屬于后者，自動(dòng)化程度高，應(yīng)用廣泛，但由于可將某些同系代謝物一并檢測導(dǎo)致檢測結(jié)果較LC-MS/MS法結(jié)果偏高'。熒光免疫層析法同屬于免疫法，具有即時(shí)檢驗(yàn)方便、快捷的特點(diǎn)，已在臨床床旁快速檢測中廣泛應(yīng)用'。
目前，熒光免疫層析法、LC-MS/MS法、EMIT法在各醫(yī)療機(jī)構(gòu)均有使用，但患者同一份血液樣本采用不同的檢測方法，其結(jié)果可能存在差異，給臨床藥師和醫(yī)師解讀藥物的監(jiān)測結(jié)果并進(jìn)行個(gè)體化治療帶來不便。此研究同時(shí)采用熒光免疫層析法、LC-MS/MS法、EMIT法檢測霉酚酸血藥濃度，比較分析3種方法檢測結(jié)果的一致性與差異性，為霉酚酸血藥濃度床旁快速檢測提供方法參考。
LC-MS2020型高效液相色譜儀
Triple Quad 4500型質(zhì)譜檢測儀
Viva-E型全自動(dòng)藥物濃度分析儀
丹大生物D20型多通道熒光免疫定量分析儀
麥考酚鈉腸溶片
嗎替麥考酚酯膠囊
嗎替麥考酚酯分散片
流動(dòng)相A相和B相、樣本萃取液、內(nèi)標(biāo)液
EMIT法霉酚酸檢測試劑盒
霉酚酸質(zhì)控品、霉酚酸定標(biāo)液
丹大熒光免疫層析法霉酚酸檢測試劑盒
兒童患者的血液樣本61份為研究樣本。患者包括腎移植、腎病綜合征、紅斑狼瘡等自體免疫性疾病患者，所有血液樣本均在患者用藥達(dá)到穩(wěn)態(tài)濃度后采集，根據(jù)霉酚酸口服劑型不同，采集時(shí)間點(diǎn)包括當(dāng)次給藥后0、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0h。
采用熒光免疫層析法、LC-MS/MS法、EMIT法分別檢測61份口服嗎替麥考酚酯的兒童患者不同時(shí)相點(diǎn)血樣中的霉 酚酸血藥濃度，采用Kolmogorov-Smirnov法、Wilcoxon配對檢驗(yàn)、Passing-Bablok回歸、Cusum法、Spearman相關(guān)分析、Bland-Altman?散點(diǎn)圖等進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
三種方法檢測霉酚酸血藥濃度的統(tǒng)計(jì)描述結(jié)果
熒光免疫層析法、LC-MS/MS法、EMIT法檢測霉酚酸血藥濃度的統(tǒng)計(jì)描述結(jié)果(n=61,ug/mL)
分別以熒光免疫層析法、LC-MS/MS法、EMIT法檢測所得的霉酚酸血藥濃度數(shù)據(jù)均呈非正態(tài)分布。
熒光免疫層析法與LC-MS/MS法檢測霉酚酸血藥濃度的回歸方程為熒光免疫層析=0.9283 ?0.9617,其截距為0.9617(95%：0.7388～1.3365)、斜率為0.9283（95%：0.8607～1.0092），LC-MS/MS法檢驗(yàn)顯示回歸偏倚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（=0.22)；熒光免疫層析法與EMIT法檢測霉酚酸血藥濃度的回歸方程為熒光免疫層析＝0.8807 ?－0.4882，其截距為－0.4882（95％??：－0.8883～－0.0144）、斜率為0.8807（95％??：0.7445～1.0575），LC-MS/MS法檢驗(yàn)顯示回歸偏倚無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（=0.78)。
散點(diǎn)圖分析結(jié)果顯示，熒光免疫層析法與LC-MS/MS法、熒光免疫層析法與EMIT法所測霉酚酸血藥濃度的差值散點(diǎn)均在血藥濃度平均值水平線上下兩側(cè)分布。熒光免疫層析法與LC-MS/MS法所測霉酚酸血藥濃度的差值中有3.28％（2/61）的差值散點(diǎn)在一致性界限外（±1.96SD），熒光免疫層析法與EMIT法所測霉酚酸血藥濃度的差值中有1.64％（1/61）的差值散點(diǎn)在一致性界限外（±1.96SD）。
熒光免疫層析法、LC-MS/MS法、EMIT 法所測霉酚酸血藥濃度的Wilcoxon配對檢驗(yàn)結(jié)果(n=61)。
配對檢驗(yàn)結(jié)果顯示，在兒童患者口服嗎替麥考酚酯后0、0.5、1.0、1.5、2.0、4.0時(shí)，熒光免疫層析法所測霉酚酸血藥濃度的結(jié)果高于LC-MS/MS法檢測結(jié)果（=3.76，=0.0002），其中有77.05%（47.61）的熒光免疫層析法檢測值高于LC-MS/MS法檢測值；熒光免疫層析法檢測霉酚酸血藥濃度的結(jié)果低于EMIT法檢測結(jié)果（=-5.96，＜0.0001），其中有88.52%（54.61）的熒光免疫層析法檢測值低于EMIT法檢測值。
綜上所述，熒光免疫層析法與LC-MS/MS法、EMIT法均分別顯示出較好的一致性和相關(guān)性，熒光免疫層析法所測霉酚酸血藥濃度結(jié)果高于LC-MS/MS法結(jié)果、低于EMIT法結(jié)果，可用于床旁快速檢測。在根據(jù)不同方法檢測結(jié)果進(jìn)行臨床用藥時(shí)，需要考慮檢測方法的差異性。
丹大生物藥物濃度監(jiān)測熒光免疫層析(POCT)解決方案
本研究建立的新型熒光免疫分析法測定霉酚酸血藥濃度的新方法丹大生物藥物濃度監(jiān)測熒光免疫層析(POCT)解決方案前處理簡單、測定快速、靈敏度高、準(zhǔn)確性好、穩(wěn)定性強(qiáng)，能滿足臨床報(bào)告及時(shí)性、準(zhǔn)確性和測定范圍等要求，可作為臨床治療藥物濃度監(jiān)測的有效方法。
